Konfokalmikroskop

Konfokalmikroskop (oder CLSM für confocal laser scanning microscope) ist ein Lichtmikroskop, das eine bessere Auflösung und meistens eine bessere Schärfentiefe als ein Linsensystem hat.

Mit einem "normalen" Lichtmikroskop ist ein Bild nur scharf, wenn das Objekt in der Brennebene liegt. Wenn das Objekt nicht in der Brennebene oder nicht flach ist, ist ein Teil des Bildes unscharf. Um das Problem zu lösen beleuchtet man nicht mit weißem Licht, sondern mit einem Laserstrahl, der mit einer Linse fokussiert wird und die Fläche rastert.

Ein Lichtdetektor misst die Intensität für jeden Punkt. Hier gibt es eine messbare Intensität nur, wenn der Punkt in der Brennebene liegt (deshalb "konfokal" oder "monofokal"). Mit bekannter Brennweite kann man die Höhe der Punkte bestimmen. Mit verschiedenen Brennweiten kann man so ein 3D-Bild des Objekts mit einem Computer berechnen. Die Auflösung ist durch die Breite des Laserstrahls festgelegt, rund 150 nm (kleine Wellenlänge wird benutzt, blaues oder ultraviolettes Licht).

Man kann mit reflektierten oder fluoreszent entstandenen Lichtstrahlen arbeiten. Mit Fluoreszenz ergibt das Verfahren eine Auskunft über den chemischen Aufbau des Objekts.

Konfokalmikroskopie ist eine optische Methode, auch wenn das Bild von einem Computer berechnet wird.